真菌形態(tài)學(xué)檢查方法

菌落形態(tài)觀察

1

直接鏡檢

KOH涂片，生理鹽水涂片。

2

染色檢查

墨汁涂片、乳酸酚棉蘭染色、派克墨水染色、革蘭氏染色、抗酸染色、吉姆薩染色、過(guò)碘酸－希夫染色（PAS）。

3

組織病理染色

HE，PAS，嗜銀染色，瑞氏染色等熒光檢查：熒光顯微鏡下直接熒光劑涂片后觀察。

真菌鏡檢的臨床意義

在無(wú)菌體液標(biāo)本中直接鏡檢發(fā)現(xiàn)真菌成分?？纱_立深部真菌病的診斷；但在有菌部位則一般只有發(fā)現(xiàn)大量(最好是多次)真菌菌絲方可作出診斷。

通過(guò)直接鏡檢發(fā)現(xiàn)特征性的真菌結(jié)構(gòu)可幫助鑒定菌種或?qū)?一般可區(qū)分念珠菌、青霉、曲霉、接合菌、鐮刀菌、著色真菌（鏈隔孢）、隱球菌、馬拉色菌、無(wú)綠藻等的感染。

提示真菌的致病性、活動(dòng)性：如念珠菌出現(xiàn)菌絲。

常見(jiàn)致病型酵母菌形態(tài)學(xué)

白色念珠菌

白色念珠菌在沙保培養(yǎng)基上呈現(xiàn)奶油色，光滑的外表。

隱球菌

隱球菌菌落形態(tài)

墨汁染色：鏡下

常見(jiàn)致病絲狀真菌形態(tài)

曲霉

左起：煙曲霉，黃曲霉，黑曲霉

1

煙曲霉

菌落-深綠色/煙綠色絲絨樣表面，鏡下-分生孢子頭為短柱狀，頂囊燒瓶狀，單層小梗，分布于頂囊上半部分，分生孢子球形。

2

黃曲霉

菌落-黃綠色/棕綠色羊毛狀/棉毛狀質(zhì)地，有放射狀溝紋，鏡下-分生孢子頭開(kāi)始呈放射狀，逐漸變?yōu)槭杷蔂?，頂囊球形或近球形，小?？蓡螌?雙層，布滿(mǎn)頂囊表面，放射狀排列，分生孢子球形或近球形。

3

黑曲霉

菌落-初為白色到黃色，最后變?yōu)楹谏?，羊毛?絨毛狀質(zhì)地，鏡下-分生孢子頭放射狀，頂囊球形/近球形，小梗雙層，密生于頂囊全部表面，分生孢子球形。

雙相真菌

馬爾尼菲青霉

菌絲相

菌絲相：25℃，2周后成熟菌落呈玫瑰紅色蠟樣，有腦回樣皺紋及放射狀溝紋，產(chǎn)生紅色色素滲入基質(zhì)。鏡下可見(jiàn)無(wú)色透明、分隔菌絲，分生孢子梗光滑而無(wú)頂囊，單鏈分生孢子，散亂分布。

酵母相：37℃，無(wú)色素產(chǎn)生。鏡下可見(jiàn)表面光滑、圓形/橢圓形/長(zhǎng)形酵母細(xì)胞，裂殖而非芽生，也可見(jiàn)短菌絲。

通過(guò)上述菌落形態(tài)特征描述，染色、鏡檢可以把常見(jiàn)致病真菌進(jìn)行分類(lèi)，對(duì)我們認(rèn)識(shí)掌握常見(jiàn)致病真菌具有重要的幫助和指導(dǎo)。